人工生殖技術：羊人工授精

ARTIFICIAL INSEMINATION OF GOATS

何謂人工授精？

　　人工授精係以人為的方法，自公畜採取精液，經過檢驗稀釋處理後，注入母畜生殖道內，以達到與自然交配同樣繁殖目的之一種方法，也就是以人為的方法藉著器材將雄性的生殖細胞（精子）注入雌畜生殖道，使與雌性的生殖細胞（卵子）結合成合子而懷孕的一種技術。

人工授精的優點：

1. 可充分利用優良種公畜，以加速繁殖。
2. 可防止疾病的蔓延。如弧菌病 (Vibriosis)、毛滴蟲病 (Trichomoniosis)、陰道炎(Vaginitis)、鉤端螺旋體病(Leptospirosis)、流產病(Brucellosis)等，這些疾病皆可藉由公畜自然配種而傳佈，若以人工授精配種，則可以減少此種疾病蔓延的危險。
3. 減少種公羊飼養頭數，節省飼養成本。採用人工授精技術的成本較飼養公羊為低，此種技術使羊隻雜交或純種 繁殖有利而且經濟。
4. 可避免配種時，因公羊與母羊體型相差太大，而發生難產或傷害的危險。
5. 精液可冷凍保存後遠送，可避免因運輸或移動種畜的麻煩，並可避免因緊迫(stress)而造成公羊的損失。
6. 可加速品種改良，生產具有雜交優勢或純種繁殖的羊種 。
7. 公羊精液可以泠凍方式半永久保存於液態氮中，有利羊之種原保存，且可以此種方式進行國內各羊場或國際間之種原交流。

羊採精所需器材：

一、電刺激方式進行公羊精液採集，所需器材如下所示；

電器採精液主機；可充電式，手動調節電刺激強度。 電極棒；含三條電極線，插入直腸中，使電極位於公羊 副性腺之上方。 精液接收器；精液收集試管等。 潤滑劑；以潤滑電極棒用。 剪刀、刷子、肥皂、70 ％ 酒精等，以清洗消毒採精部位。

二、精液檢查、稀釋、保存所需器材：

有刻度試管四支； 100 ml 燒杯四個； 3 ％ 生理鹽水( 3 ％ Saline)； 2.9 ％ 枸椽酸鈉( 2.9 ％ Sodium citric acid) ，與蛋黃、甘油等。 Thomas 血球計數盤，與載玻片蓋玻片及計數器； 顯微鏡； 0.5 ml 麥管，1 ml 塑膠注射筒； 液態氮桶、液態氮液、與麥管架，降溫溫度計等。

採精過程：

一、假陰道法（或稱人工陰道法）：

人工陰道為一硬的圓筒，內襯橡皮，橡皮與硬壁間灌入 40∼42℃ 溫水，使溫度、壓力與母羊陰道相似，人工陰道一端連接有刻度的玻璃容器，做為收集精液之用。橡皮內管塗以潤滑劑或以稀釋液潤濕之，然後，將管口向下傾斜 35 度；採精時，當公羊駕乘試情母羊或假母台時，將陰莖導入假陰道內，射出之精液即流入管的另一端精液容器內。

二、以電刺激採集方式的採精過程：

供採精公羊之保定： 用細綿繩固定羊角後，將頭部保定於圍欄或木柱，或請助手直接壓迫保定公羊。 清洗及消毒： 以肥皂及刷子清洗陰莖包皮部位初步消毒，隨後拭乾以 70 ％ 酒精噴 灑，再以生理鹽水沖洗，完成消毒步驟。 採精： 當公羊保定，清洗、消毒完成後，採集者即位於公羊之側邊，請另一助手取電極棒，前端塗上潤滑劑，從肛門直接插入直腸中，並以手扶持電極棒，隨後採集者，右手控制電刺激器主機，以調整電流強度，左手持精液收集器，刺激開始時，先以低電壓電流經由直腸刺激生殖道肌肉，公羊在通電時有強烈之僵直現象，在刺激停止時則又恢復原狀，通常以低電流短暫間歇性之刺激至較高電流，如此反覆刺激，以使公羊射精。當公羊陰莖伸出時，精液接收器則置於陰莖下方，以收集精液。 精液性狀檢查： 精液採取後，必須立即移送至實驗室檢查，因精蟲在體外對溫度的突然改變非常敏感，因此，在採集後須避免溫度之急遽變化。 A.精子數計算：吸取定量之精液與 3 ％ 濃度的生理鹽水，經充分混合後，取一滴    置於 Thomas 血球計數板於顯微鏡下，計算落於計數板方格內之精子數，最後將方格內之精子數依下列公式計數每 c.c. 所含的精子濃度，以做為精液稀釋之參考。 精子濃度（精子數／c.c.）＝ 方格內所算得精子數× 10 ×稀釋倍數× 1000 〔例如〕方格內精子數為 200，稀釋倍數為 200，則精子數為： 200× 　　　　　　10×200×1000＝4×108 /c.c. B.精蟲活力檢查：取一滴精液樣品於載玻片，並覆上蓋玻片，置於附有恆溫器之顯微鏡上檢查，通常公羊精液，由於具有高濃度的活潑精子，因此，在鏡下呈現漩渦波浪形的移動，精蟲的活力與受胎率有密切之關係。 精液稀釋及保存： a.首先製備 2.9 ％ 枸椽酸鈉溶液，取 29 公克枸椽酸鈉溶解於 1000 ml 蒸     餾水中，並加入抗生素。 b.配 A 溶液（不含甘油）：154ml 2.9％ 枸椽酸鈉液加 40ml 新鮮卵黃。       B 溶液（含甘油）：132ml 2.9％ 枸椽酸鈉加 40ml 卵黃，再加 28ml 甘油。 c.稀釋步驟：以總稀釋量 1/2 之 A 溶液與原精液緩 慢進行稀釋，並置於 4℃ 平衡 2 小時以上，待 A 溶液平衡後，再與 1/2 之 B 溶液緩慢進行稀釋， 再置於 4℃ 平衡 4 小時以上。 d.保存：經稀釋平衡後之精液，以 1ml 的注射筒吸起注入已編號的 0.5ml 麥管，並置於降溫槽內進行冷凍，最後長期半永久存於 -196℃ 液態氮中，以備使用。

母羊的發情觀察：

母羊的發情週期平均為 20 天左右，每次發情持續時間平均為 36 小時，發情的徵候是：外陰部紅腫、流粘液，不停鳴叫並有規律性的搖尾，少部份母羊會有互相駕乘的現象，如果有試情公羊存在時，發情行為更為明顯，並主動接近公羊。

母羊人工授精最佳時間：

　　注入精液之時間與受胎與否有密切之關係，如果誤了時間，即使注入多量之精液亦徒勞無功，因此，欲獲得最高的受胎率，須使精蟲與卵在最適當時間結合，一般母羊授精之適當時間為觀察到母羊發情徵候後的 8~12 小時。如下表：

配　　　種　　　最　　　佳　　　時　　　間
時　期	發情前期	正　在　發　情	發　情　後　期	排卵與受精
期　間 （小時）	6∼10小時	12∼22小時 （平均18小時）	精子生存 大約24小時	卵的生存 6∼12小時
發情開 始後的 時間　　　　　　　0		4　8　12　16	20　24　28	32　36　40
適期：太　早	可以	最　適　期	可以	太　　　　晚

羊人工授精操作過程

一、人工授精所需器材

70 ％ 酒精與良性消毒水，以消毒外陰部及授精器材； 陰道張開器（或膣鏡，日本製 FHK）； 直式或彎式凱利止血鉗 (Kellly hemostatic forcep) 各一支，以固定母羊子宮頸用。 照明燈，一只； 鐵質授精槍，一支； 溫水器 (CTTO,warm water thaw)；以回溫解凍冷凍精液 麥管用；

二、授精技術：

1. 授精母羊保定：羊之體軀較小，為工作方使起見，須將其固定於固定架，若無固定架時，則以人力固定之。保定者背靠於圍欄，將母羊之頭頸部夾於兩腿間，雙手各緊握母羊兩後肢，並將之舉起緊貼於胸前以保定之。
2. 保定後，助手一方路面迅速以 37℃ 溫水於溫水器 內解凍精液麥管，並裝入授精槍內，一方面授精操作者，先將母羊外陰部拭淨，並以 70％酒精清潔消毒，隨後準備已浸泡在良性消毒水之陰道張開器塗上潤滑劑，並徐徐插入陰道內張開陰道，筧得子宮頸口後，以左手持張開器，右手持止血鉗夾住子宮頸口固定之，並向後拉直，再交由左手固定之，右手再持授精槍 (Cassougun)，插入子宮頸內深約 2/3 處，即可將精液注入，注畢後取出授精槍，同時將張開器合攏後取出。爾後並注意觀察到下一個正常發情週時，注意其是否有再度發情的現象。

展 望：

　　高的受胎率，較多的產仔數以及優良遺傳基因之快速傳播，為人工授精技術所追求的目標。羊隻人工授精係採取優良種公羊之精液，經檢驗稀釋處理後為母羊配種，以協助推動羊隻品種改良和提高羊奶及羊肉品質，並在謹慎的操作下，更能減少疾病傳染的機會，因此羊的人工授精技術極為適合目前圈飼經營的養羊型態。

參考文獻：

1. 載榮袞，鍾炳坤。1979。人工授精學。
2. 西川義正。1958。家畜人工授精法。P282-306。
3. Dauid A. Morrow. 1986. Current theragy in theriogenology, P575-629.
4. Mcdonald, L. E. 1980,Endocrinology and reproduction, 11:330-367.

推廣人簡介：

1. 謝瑞春
2. 台灣省畜產試驗所恆春分所畜產系
3. 省立屏東農業專科學校三年制獸醫科