生殖細胞的冷凍        10       第二章 精子銀行

 

cgcp10.jpg (11631 個位元組)

 

 

生殖細胞的冷凍      11      第二章 精子銀行

 

第二章 精子銀行

  家畜禽的精子銀行之目的在於延長特殊性能公畜禽的使用年限,使其遺傳基因亦可被保存與永續利用。精子是一種細長型細胞且有活動力的細胞,可分頭、頸和尾等三部份,因此冷凍解凍後常以精子活動力和前進方式做為評估,並據以做為是否有受精力的指標。

精子形成的時間

  成熟的雄性哺乳動物,從精母細胞(Spermatogonia)發育成有受精力的精子(Sperm),其精子形成所需的天數隨動物別而有些差異。雄性哺乳動物的精子形成數量通常也跟其睪丸大小有關,而貯存精子的副睪(Epididymis)更會直接影響到精子的受精力,因精子的細胞質滴在副睪尾脫落後才會進一步成熟。精子數依動物類別而有些差異。

精子形成數與貯存數

項目

乳牛

綿羊

倉鼠

老鼠

體重(公斤)

200

1200

100

1000

4

0.15

0.3

12

70

睪丸重
(公克)

720

800

500

340

6

4

4

70

40

精子形成數
(億/天)

162

75

95

53

0.16

0.74

0.86

1.1

2.0

每公克睪丸的精子形成數(億/天)

0.23

0.12

0.21

0.16

0.25

0.24

0.23

0.23

0.05

副睪

的精

子貯

存數

(億)

360

190

230

96

3.6

1.5

2.6

12

510

47

110

110

1.2

   

42

1040

380

1260

500

16.0

10.2

4.5

57

輸精管

76

75

22.0

12.0

>20

合計

>1850

690

>1650

770

22.0

12.0

>7.0

>130

一次射精的精子數(億)

150

60.0

40

70.0

0.12

0.08

0.06

4.0

2

 

 

生殖細胞的冷凍       12       第二章 精子銀行
 

精子通過副睪的天數

副睪
部位

乳牛

綿羊

倉鼠

老鼠

3

2

1

1

3

3

3

2

1-2.5

2

2

3

1.5

1

2

3

1

0.5

4-9

10

8

6

5-6

8

5

5

5

合計

9-14

14

13

7.5-10

9-10

13

11

8-10

1-12

 

精子形成(Spermatogenesis)的天數

動物類別

精子形成的天數

(Boar)

34.1

乳牛(Bull)

54.0

綿羊(Ram)

49.0

(Rabbit)

51.8

(Dog)

54.4

倉鼠(Hamster)

35.0

老鼠(Rat)

53.2

小鼠(Mouse)

35.0

(Monkey)

42.0

(Human)

74.0

冷凍精液的稀釋、保存和授精標準

冷凍劑的生物物理性

物性

雙甲基磺氧化物(DMSO)

甘油
(Glycerol)

乙二醇
(Ethylene glycol)

化學式

(CH3)2SO4

C3H5(OH)3

(CH2)2(OH)2

分子量(公克)

78.13

92.10

62.07

比重(g/cm3; 20oC)

1.10

1.25

1.11

重量配法(g/L): 1.0 M

78.13

92.10

62.07

3.0 M

234.39

276.30

186.21

體積配法(ml/L): 1.0 M

71.00

73.70

55.90

3.0 M

213.10

221.10

167.70

品質等級之需求

Grade

Lab. Grade

Lab. Grad

 

生殖細胞的冷凍       13       第二章 精子銀行

 

冷凍精液用的蛋黃乳糖稀釋液(Foote, 1980)

成份

山羊

綿羊

Tes-N-Tris (g)

-

-

-

12

-

Tris (g)

24.2

24.2

36.3

2

-

Citric acid monohydrate (g)

13.4

13.4

19.9

-

-

Glucose or fructose (g)

10.0

10.0

5.0

32

50

Lactose (g)

-

-

-

-

3

Raffinose (g)

-

-

-

-

3

Penicillin (units/ml)

1000

1000

1000

1000

1000

Streptomycin (ug/ml)

1000

1000

1000

1000

1000

Polymyxin B (units/ml)

500

-

-

-

-

Glycerol (ml)

70

80

50

10

50

Egg yolk (ml)

200

100

150

200

50

Orvus ES paste (ml)

-

-

-

5

-

以蒸餾水配成的總體積(ml)

1000

1000

1000

1000

1000

 

冷凍精液的稀釋、保存和授精標準(Hafez, 1993)

項目

山羊

綿羊

保存溫度(oC)

-196

-196

-196

-196

-196

保存年限(年)

>1

>1

>1

>1

>1

原液1 ml可稀釋成量(ml)

10-75

10-25

5-10

4

2

授精量(ml)

0.2-1

0.5

0.05-0.2

50

20-50

授精的活精子數(億)

0.15

2

2

50

15

最佳授精期(發情後幾小時)

9-20

12-36

10-20

15-30

48-120

最佳授精位置

子宮

子宮

子宮

子宮

子宮

授精母畜數:一次採精

300

15

15

10

5

一週

1000

150

150

30

15

第一次授精的受孕率(%)

60

60

50

65

30-50