乳房炎
檢測及治療中興大學獸醫學系 莊士德
一、前言
歷年來所推動的一些乳房炎防治工作，包括搾乳前使用紙巾擦拭乳頭、搾乳後乳頭藥浴、CMT檢驗各分房乳汁、乾乳期乳房炎的治療，以及搾乳機性能測定等，但仍未能有效降低臨床性乳房炎發生的比率以及總乳體細胞數之數目；在自我檢討後，我們均深刻的發覺，現代的牧場經營理念實應包括現代化且適合臺灣中、小型乳牛乳房炎防治概念。在今日，台灣急需各方面努力地互相配合，推廣各項措施，包括酪農、現場獸醫人員、乳品加工業者、醫藥業者、搾乳機專家、學者、以及實驗室研究人員等。現場防治工作品質的提升，不僅可增加牛乳產量，降低酪農成本負擔，並可供應消費者高品質的鮮乳與其他乳品，提升消費者對乳品的信心，進而促進乳品工業的成長；在面對加入WTO所因應的衝擊日益升高之時，更是突顯其必然之重要性。
二、乳房的解剖學與牛乳的生成
一般稱母牛的乳腺組織為乳房，為一重要的母性器官，通常位於身體之後腹部下緣，前面可到達臍部，後面則可到達兩後肢之間。乳房在幼齡時期甚小而不發育，於懷孕階段開始發育並擴大。乳牛的乳房由四個分房(意即二對乳腺)構成，每個分房自成一完整獨立的系統，所以若有乳房炎發生，有可能只局限於一個分房。乳房的大小、形狀與乳頭的長度(6-8cm)均與乳產量、乳房的健康甚至搾乳條件有相當大的關係。
乳腺細胞自血液及淋巴液中吸收各種乳汁原料，經酵素作用形成乳汁分泌於外。泌乳需有生乳素、腎上腺皮質素、甲狀腺素及胰島素的配合；又腦下垂體後葉所分泌的子宮收縮素，可以使乳腺內平滑肌收縮，集乳管變粗變短，終而促使乳液排出。
三、乳房炎的定義
乳房炎是乳腺發炎的一種反應，由於乳房的泌乳組織受物理性、化學性創傷或微生物感染所引起，其中以微生物侵入乳房導致的乳房炎佔大部份。
四、乳房炎的發生
乳牛乳房炎一直是乳牛場中感染率最高且影響經濟效應最大的傳染病，然而此疾病的形成，有著一連串的複雜因素。基本上，乳牛發生的原因可分成五大類，其中酪農本身的工作，在乳房炎的防治上，就佔有相當重要的角色。
1. 傳染病病原菌。 2. 管理，包括搾乳衛生、搾乳技術、與搾乳機性能。 3. 營養代謝障礙。 4. 乳牛本身。 5. 環境。
五、乳房炎的分類
乳牛的乳房炎可以依據不同的病原菌種類區分，如葡萄球菌、鏈球菌、大腸桿菌、巴士德桿菌、黴漿菌，其他如布氏桿菌、結核菌及其他細菌等。依照乳腺病理學變化則可以把乳房炎分成滲出性乳房炎、纖維素性乳房炎、間質性乳房炎、壞死性乳房炎、壞疽性乳房炎與化膿性乳房炎等。臨床上通常則依據乳房炎病程發展的速度，把乳房炎分成甚急性、急性、亞急性、慢性、潛在性及非特異性等乳房炎。但對於一個在乳牛場工作的人來說，乳房炎較有意義的分類則是把乳房炎分成臨床型乳房炎與非臨床型乳房炎，。
1. 臨床性乳房炎 (Clinical mastitis)乳房：外表顏色改變、腫脹，觸診時有熱感及組織硬化，牛隻有時感到疼痛。
乳汁：含有各種形式的凝固物、膿塊、血液，乳汁之性質已有所改變。
2. 非臨床性乳房炎 (Subclinical mastitis)乳房：無肉眼可見之改變。
乳汁：乳汁外觀無特異改變，但乳之中體細胞數上升，從乳汁之中有時可分離出病原菌
六、非臨床性乳房炎防治的重要性
1. 其發生率為臨床性乳房炎的15至40倍。
2. 會有轉變成臨床性乳房炎的趨向。
3. 長期存在於泌乳組織中。
4. 難以用一般性的方法診測。
5. 使乳量劇烈減少。
6. 影響生乳品質。
七、乳房炎的檢測方法
1. 物理性檢查 (Physical examination)
括身體健康情形觀察與乳房的視診及觸診，乳房檢查時，應由前後左右特別注意乳房的外觀、對稱性與大小是否異常，乳頭或乳房上是否有外傷，或有炎症的症狀，如紅、腫等；檢查乳房也應該用手做觸診，可感覺到乳房皮膚的溫度是否過高、有無疼痛反應，以及乳房組織、乳腺槽與乳頭是否正常；平常榨乳前的前榨乳步驟則可以了解乳汁的顏色以及均質度等。
2. 前乳檢查 (Strip Test)
3. 加州乳房炎試驗 (California Mastitis Test)
牛乳中的體細胞數多寡可以用來判定乳房炎發生的程度，一般在現場都應用加州乳房炎試驗(California Mastitis Test, CMT)來檢驗牛乳；而要正確的得到其數目則得依靠實驗室中的一些人工數算方法，或以乳體細胞數測定機器來檢測。牛的乳體細胞數若超過500,000/ml，則被認定為有乳房炎。加州乳房炎試驗 (California Mastitis Test) 可以間接地檢測出乳汁中的體細胞數，了解牧場內牛隻的健康情形，最重要的，因其所需的技術與器具並非複雜，酪農自己便可操作，隨時掌握牛隻的健康。此試驗的應用情形略述於下：
(1) 定期的乳房健康監測 一般定期以2-4週，做一次CMT，並常做比較。當場裡CMT陽性反應牛隻頭數過多時，應特別注意牧場的消毒工作及搾乳衛生。平常即應先搾CMT陰性反應的牛隻再搾陽性反應的牛隻以減少疾病傳播的機會。 (2) 乳房炎牛隻的診斷 可以預先檢測搾乳困難或乳房內外部已有任何病變的牛隻，有乳房健康障礙的牛隻，應即刻予以採樣、做細菌分離，並治療。 (3) 作為治療結果的判定 CMT可以應用在最後一次治療後約8-10天，呈現的結果，可以幫助我們瞭解治療結果的好壞。 (4) 乾乳前的應用 建議在乾乳前10-14天，做一次CMT，若有陽性的牛隻，應立即採樣做細菌分離和治療；呈陰性的牛隻，在每天仍有二次搾乳時，應再做最後一次CMT的監測。 (5) 總乳體細胞數過高時的檢查 若總乳體細胞數過高時，CMT可以幫助我們瞭解，體細胞數過高的各別牛隻，以再做一次乳樣品的檢查。 (6) 分娩後乳汁的檢查 分娩後乳質正常時(約5天後)，做CMT可測出牛隻乾乳期間有否任何的傳染病發生。 (7) 牛隻買入前的檢查 (8) 牛隻拍賣前的檢查
4. DHI體細胞數 (DHI Somatic Cell Counts)
5. 電導度測定 (Electrical Conductivity)
在現場雖然有一些學者利用電導度高低來作為非臨床型乳房炎之指標，但在統計學上有意義的研究報告仍未清楚表示，電導度的增加與乳以細胞數的增加有絕對的關係。
6. 乳中微生物分離 (Culture of Milk Samples)
實驗室中的一些細菌學檢查可以找出牛乳中存在的病原菌種類，並且可以利用抗生素敏感性測驗結果，輔助臨床上使用最佳種類的抗生素，以有效的殺死病原菌、達到治療的目的。
7. 總乳的檢查 (Bulk Milk Sample Test)
八、乳房炎的治療
目的在殺死病原菌、縮短病程，以及維持乳腺組織的功能。在投與藥物之前，先分離出病原菌，並從敏感性試驗中依照需要，使用長效性或短效性的Antibiotics或Sulfonamides。
1. 臨床性乳房炎治療失敗的原因：
(1)用藥時間過晚，組織已有不可恢復性的嚴重病理變化。
(2)乳腺管道因纖維化或痂痕組織增生而受阻，以至藥物無法達到病原菌存在的位置。
(3)使用非有效的藥物，或病原菌產生抗藥性。
(4)藥物劑量過低。
(5)用藥過程過短。
2. 非臨床性乳房炎的治療要點：
(1)原則上，當全場牛隻體細胞數檢測、以及加州乳房炎測試結果，均呈現有立即治療的必需性時，應予
以治療，以防止組織過度受損、或轉變成臨床性乳房炎，甚至造成乳房炎病原菌的的散播。
(2)在經濟衡量上，可以考慮至乾乳前再施以藥物治療。
3. 其他治療乳房炎的方法
(1) 20-20 IU Oxytocin i.m., 2-3 times,
(2) 5% Glucose a.q. 500-1000ml i.m.
九、乳牛乳房炎微生物室之建立
乳房炎的發生，攙雜了許多複雜的因素，諸如微生物的感染、環境與氣候的變化、飼養與管理條件之優劣，以及搾乳的技術和衛生等；而病原菌侵入乳腺組織造成炎症的發生，乃是乳牛發病的最重要原因。因此，一個設備簡單，卻能分離大多數乳房炎病原菌的微生物室，不僅能幫助臨床獸醫師有效地作出病原診斷，並能提供藥物治療參考的依據。如眾所知，細菌的種類繁多，因此鑑定工作與所需器材本就是艱難且複雜；僅管如此，仍然可以依據臨床需要，建立一套簡單卻有效的微生物分離、培養與鍵定模式，作為現場獸醫師病原診斷與治療的輔助。
十、引起乳房炎的微生物種類
1. 傳染性 (Contagious type)
(1)金黃色葡萄球菌 (Staphylococcus aureus)
(2)無乳鏈球菌 (Streptococcus agalactiae)
(3)牛黴漿菌 (Mycoplasma bovis)
(4)牛棒狀桿菌 (Corynebacterium bovis)
2. 環境性 (Environmental type)
(1)無乳鏈球菌以外的鏈球菌屬：
乳房鏈球菌 (Streptococcus uberis)
異乳鏈球菌 (Streptococcus dysgalactiae)
(2)大腸桿菌型 (Coliforms)：
大腸桿菌 (Escherichia coli)
克雷氏肺炎桿菌(Klebsiella pneumoniae)
氣性腸桿菌 (Enterobacter aerogenes)
3. 其他 (Others)
(1)金黃色葡萄球菌以外的葡萄球菌屬
S. hyicus ssp. hyicus
S. simulans
S. xylosus
S. epidermidis
(2)綠膿桿菌 (Pseudomonas aeruginosa)
(3)化膿放線菌 (Actinomyces pyogenes)
(4)努卡氏菌屬 (Nocardia species)
(5)念珠菌屬 (Candida species)
(6)桿菌屬 (Bacillus species)
(7)鋸桿菌屬 (Serratia species)
(8)巴斯德桿菌屬 (Pasteurella species)
(9)藻類 (ex. Prototheca zopfii)
十一、細菌分離的材料與方法
(一)培養基的製作
為培養乳汁中分離的微生物，需準備二種不同的培養基，分別是一般性的培養基(dehydrated Bacto Tryptose Blood Agar Base DIFCO, No. 0232-01-9)，以及Edwards medium (OXOID, Code CM27)，以上二種培養基均需另外添加5-10%牛脫纖血液。
(二)病原菌在培養基上的生長特性
大部份由乳汁分離的細菌在37C下，經過16至24小時發育後，可在血液和Edwards培養基上，依照下列簡單原則來判定其種類：
1. 鏈球菌(Streptococci)：
菌落小，表面平滑或稍具凸形，光亮或稍具透明特性，可在Edwards medium上生長良好，aesculin-posivive(在紫外線燈照射下，菌落與培養基表面有棕色反應)， 或aesculin-negative (在紫外線燈照射下，Edwards medium呈藍色螢光反應)。
2. 金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)：
菌落形態大小中等，略呈圓形，表面平滑或稍具凸形，不透明，大多呈黃色，有時呈灰色或白色，有beta-溶血圈或並具alpha-與beta-溶血圈是其最大特色。
3. 其他的葡萄球菌(other staphylococci)：
菌落形態與Staphylococcus aureus類似，但通常不形成beta-溶血圈。
4. 革蘭氏陰性桿菌(coliforms)：
在一般培養基上生長良好，菌落大小中等或較大，不透明，或呈白色或灰色，表面平滑或拱狀，大部份菌株會有金屬光澤，菌落外觀有粘稠感，常伴隨有發酵或尿素的臭味。
5. 化膿棒狀桿菌(Actinomyces pyogenes)：
此菌在嗜氧環境經24小時發育後，菌落仍呈針點狀，稍具灰白色；48小時後，出現肉眼可見小型的beta-溶血圈。
6. 牛棒狀桿菌(Corynebacterium bovis)：
此菌生長特性和菌落型態與Actinomyces pyogenes類似，生長速度也很緩慢，然而卻無溶血圈。
(三)菌種的鑑定
實驗室菌種的鑑定，一般以blood agar上初代分離的菌落作為材料。
1. 革蘭氏染色法(Gram stain)
革蘭氏陽性、陰性菌染色區別法，是一般微生物室最常用在細菌鍵定的試驗之一種。
2. 觸脢試驗(Catalase Test)
觸脢是一種血蛋白，其化學結構和血紅素相類似，可以分解過氧化氫(H2O2)成為水(H2O)和氧氣(O2)，利用此實驗(Roche, art:0730378)可以區別葡萄球菌(陽性)及鏈球菌(陰性)。驗時，用白金耳取1至2個菌落至載玻片上塗抹均勻，再滴入試劑(過氧化氫H2O2)，有氣泡迅速冒出者判定為陽性，無氣泡或氣泡生成速度較為緩慢者為陰性。
3. 乳膠凝集試驗(Latex Agglutination Test)
採用本試驗OXOID (DR587) 為要鑑定鍊球菌屬中的B血清型菌，亦即Streptococcus agalactiae。其試驗中含有與乳膠結合的兔化免疫球蛋白G，可以與B群鍊球菌結合，發生肉眼可見的反應。
於一小試管中，盛入0.4ml脢粹取液，以白金耳刮取Edwards medium 上培養16~24小時而欲待鑑定的鍊球菌菌落2~4個，置入脢粹取液並輕微攪拌使菌落掉入，並置於37C培養箱中。5分鐘後稍加震盪，再放入培養箱中繼續作用5分鐘。之後，於其中取0.05ml滴在一反應板上，再加入特殊的乳膠混合試劑，使其均勻混合1至2分鐘後，若有微小顆粒形成，則判定為陽性，反之為陰性。
4. 凝血脢試驗(Coagulase Test)
此試驗可以用來區別乳房炎病原菌中，金黃色葡萄球菌(傳染性病原菌)與其他的葡萄球菌屬(環境性病原菌)。在金黃色葡萄球菌的細胞壁上，存在一種特殊的蛋白脢，又稱為凝血因子(clumping factor)，可以直接使血中纖維素原(fibrinogen)變成纖維素(fibrin)，而產生凝集現象。
取欲鑑定之菌落2~3個，加入此試驗(Staphylase-Test, OXOID, DR595)之反應試劑(DR596)，並於以均勻混合；當有凝集現象出現時，則為陽性，否則為陰性。